備選
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試劑的準備
20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板方法
手工洗板:甩盡孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置1min后甩盡孔內液體,在吸水紙上拍干,如此洗板5次。
自動洗板機:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
操作步驟
從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
樣本孔先加待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。
除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
結果判斷
繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值。
試劑盒性能
準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。
靈敏度:最低檢測濃度小于1.0 U/L。
特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
重復性:板內、板間變異系數均小于15%。
貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
有效期:6個月
免責聲明
試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗,否則所產生的一切后果,由實驗者承擔,本公司概不負責。
嚴格按照說明書操作,實驗者違反說明書操作,后果由實驗者承擔。